上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日
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■ 制品内容 |
T4 DNA Ligase (350 U/μl) |
25,000 U |
10X T4 DNA Ligase Buffer |
1 ml |
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■ 制品说明 |
本酶催化相邻DNA链的5’-P末端和3’-OH末端以磷酸二酯键结合的反应,需Mg2+和ATP作辅因子,分子量为62,000,最适反应pH为7.6。本酶可以催化粘性末端之间和平滑末端之间的DNA的连接。 |
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■ 保存 |
-20℃。 |
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■ 起源 |
Escherichia coli carrying the plasmid that encodes the gene of T4 DNA ligase |
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■ 活性定义 |
在20 μl的连接反应体系中,6 μg的λDNA-Hind Ⅲ的分解物在16℃下反应30分钟时,有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。 本酶的1 unit相当于在含有6.6 mM MgCl2,10 mM DTT,66 μM ATP和3.3 μM [32P]-Na4P2O7的66 mM Tris-HCl (pH7.6) 中发生ATP-PPi交换反应的0.008 Weiss Unit。 |
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■ 用途 |
1. DNA片段和载体DNA的连接。 2. DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。 |
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■ 注意事项 |
连接反应因末端碱基序列的不同而反应速度各异,一般有下列倾向 (由快至慢): 突出末端:Hind III>Pst I>EcoR I>BamH I>Sal I 平滑末端:Hae III>Alu I>Hinc II>Sma I EcoR V>Sca I>Pvu II>Nru I 其中连接Hind III 末端的速度约为连接Sal I 末端速度的10~40倍; 而连接Hae III 末端的速度约为连接Sma I 末端速度的5~10倍。 |
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页面更新:2023-12-01 14:16:35