BINKIT® NK细胞扩增试剂盒试剂盒-Wako富士胶片和光

BINKIT® NK细胞扩增试剂盒试剂盒-Wako富士胶片和光

供货周期 一个月 应用领域 生物产业

BINKIT ® NK细胞增殖套装(外周血单核细胞来源):
BINKIT® 可从外周血单核细胞扩增高活性的自然杀伤(NK)细胞。

BINKIT® NK细胞扩增套装(外周血单核细胞来源)BINKIT® NK细胞扩增试剂盒试剂盒-Wako富士胶片和光

 

◆原理

  BINKIT® 可从外周血单核细胞扩增高活性的自然杀伤(NK)细胞。

 

◆优点・特色

●无需饲养层细胞,即可从外周血细胞 (PBMCs)中扩增NK细胞

3周时间内NK细胞的数目可扩增几百到几千倍

NK细胞将获得增强的细胞杀伤性

该试剂盒适合20~50 mL的外周血细胞

Xeno-free(不含动物来源的材料)

 

 

◆案例・应用

<试剂盒组成>

NK 细胞初始培养基

NK细胞初始培养瓶

NK细胞传代培养基

BINKIT® 明细表(PDF格式)

 

<未提供材料>

Ficoll 淋巴细胞分层液(GE Healthcare)

无菌PBS

FBS或自体血浆(56℃加热30分钟以灭活)

 

<结果>

BINKIT&#174; NK细胞扩增试剂盒试剂盒-Wako富士胶片和光

图 1 使用BINKIT® 进行体外NK细胞扩增

利用BINKIT® 对外周血单核细胞进行NK细胞扩增,CD3-CD56+细胞从15.8%增加到88.6%。

 

 BINKIT&#174; NK细胞扩增试剂盒试剂盒-Wako富士胶片和光

图 2 使用BINKIT® 进行体外NK细胞扩增

利用BINKIT® 对外周血单核细胞(来自健康自愿者,HD, n=3)进行NK细胞扩增。

细胞计数(左)和倍率的变化(右)表明NK细胞体在外高效扩增。

 

BINKIT&#174; NK细胞扩增试剂盒试剂盒-Wako富士胶片和光 

图3  使用BINKIT® 进行体外NK细胞扩增

分别以BINKIT扩增的NK细胞(实线)和从3名志愿者新鲜分离的NK细胞(虚线)来检测NK细胞对K562细胞的杀伤性。

结果表明,扩增后的NK细胞对K562细胞杀伤性显著增强(P<0.01)。

 

<培养步骤>

(1) 准备试剂

在NK细胞初始培养基和NK细胞传代培养基中,加入5% (v/v) 的热灭活FBS或自体血浆。

(2) 制备外周血单核细胞(PBMCs)

通过Ficoll密度梯度离心,从人全血中分离外周血单核细胞。

(3)清洗NK细胞初始培养瓶

加入10 mLPBS至NK细胞初始培养瓶。倾斜培养瓶使PBS覆盖整个表面。

将培养瓶中液体全部倒出,小心以免刮伤培养瓶的表面。重复洗涤过程两次。

(4)从PBMCs中培养NK细胞

将1×106 cells/mL 的PBMCs 悬浮于NK细胞初始培养基中。每1 mL 细胞悬浮液加入40 μL的NK细胞初始混合物。

细胞悬液转移至预洗涤的NK细胞初始培养瓶,在37℃,5%的CO2培养3天。

(5)更换培养基及传代

同贴壁细胞处理一样,转移时置于锥形离心管,200×g离心8分钟。

去除上清,将1×106 cells/mL 的NK细胞悬浮于传代培养基中,培养基内加入5 mL

转移后的悬浮细胞置于常规培养瓶中,在37℃,5% CO2条件下培养。

每2-3天将 0.8×106 cells/mL 细胞置于*NK细胞传代培养基中,进行传代培养。

 

<建议培养期>

2-3 周

注意:试剂仅供科研使用,不可用于临床。 

 

产品编号 产品名称 产品规格
 BIJ-N501-1 BINKITNK细胞增殖套装(外周血单核细胞来源)  1 kit
BIJ-N501-2  BINKITNK细胞增殖套装(外周血单核细胞来源  2 kits 
 BIJ-N501-4 BINKITNK细胞增殖套装(外周血单核细胞来源   4 kits
 BIJ-N501-8 BINKITNK细胞增殖套装(外周血单核细胞来源   8 kits

 

BINKIT® NK细胞扩增套装(外周血单核细胞来源)