GenomONE™ Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-wako富士胶片和光

GenomONE™ Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-wako富士胶片和光

供货周期 一个月 规格 1set
应用领域 生物产业 主要用途 DNA、siRNA、ODN及蛋白转染

GenomONE™-Neo EX仙台病毒包膜转染试剂
原理
待转移的分子(如DNA,蛋白,Antisense Oligonucleotide, siRNA等)与HVJ-Envelope (HVJ-E) 混合后,形成了HVJ-E载体。利用病毒衣壳蛋白的侵染能力,在融合蛋白(F)的作用下,直接与细胞融合,将分子转入目标细胞或组织。

GenomONE®Neo EX 仙台病毒包膜转染试剂

GenomONE™ Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-wako富士胶片和光

可用于DNA、siRNA、ODN及蛋白转染!

 

 

原理

 

GenomONE™ Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-wako富士胶片和光

 

  待转移的分子(如DNA,蛋白,Antisense Oligonucleotide, siRNA等)与HVJ-Envelope (HVJ-E) 混合后,形成了HVJ-E载体。利用病毒衣壳蛋白的侵染能力,在融合蛋白(F)的作用下,直接与细胞融合,将分子转入目标细胞或组织。

 

  * HVJ-E:Hemagglutinating Virus of Japan Envelope。

  ** 现已有200多篇文献使用该试剂盒,如需样本案例,请向我司索取。

 

 

优点、特色

 

      目前市面上少有的转染试剂盒,可用于细胞、组织和活体动物。可用于:

 

siRNA
      少量siRNA也可高效发挥敲除作用,无需化学修饰siRNA,高表达量。

 

DNA
      无论序列长短、线性或环状均可
 

Oligonucleotides
      DNA、RNA
 

蛋白
      保持酶和抗体的功能性与特异性
 

体内转染 !!
      大量操作和文献引用证明HVJ-E载体可直接将目标分子转移到活体动物产生作用。
 

高通量筛选
      可同时转染多种分子

1. 运用范围广
     GenomONE HVJ-E载体试剂盒可将多种分子(质粒DNA、siRNA、寡核苷酸、蛋白、抗体等)转进培养细胞(贴壁和非贴壁细胞)和组织。也可用于敏感原代细胞和 活体动物转染。每种领域的GenomONE®-Neo EX运用情况,均有大量文献报道。(如需文献列表,请向我司索取)

 

2. 安全性
     与阳离子脂质体不同,GenomONE®-Neo EX是通过膜融合作用将分子导入细胞,而脂质体转染的内吞作用可能造成转染分子经溶酶体作用而降解。GenomONE®-Neo EX内含*灭活的HVJ病毒颗粒,其具有侵染力而无潜在增殖能力,使用非常安全,无需特殊的防护措施    

 

3. 方便简单
     GenomONE 即开即用,试剂盒内包含了操作中主要使用的HVJ-E冻干粉和各种辅助试剂      

  

案例、应用

 

  GenomONE®-Neo EX和传统的脂质体转染和电穿孔法相比,有更高的转染效率和更低的细胞毒性,可更有效的发挥siRNA的knock-down作用。

 

in vivo

 

大鼠颌下腺逆行注射siRNA

  Ca2+-dependent Cl channel protein (rCLCA)表达的特异性抑制。

 

免疫染色

 

 

GenomONE™ Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-wako富士胶片和光      GenomONE™ Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-wako富士胶片和光

   non-injection side            rCLCA siRNA-injection side

 

  rCLCA siRNA(2 nmol)和GenomONE-Neo(2AU)混合后,以逆行注射的方式注入大鼠颌下腺。四十八小时后,用免疫染色检验siRNA注射对氯离子通道蛋白表达的抑制作用。
  ST:纹状管,G:颗粒曲管,A:腺泡

  【相关文献】

  K. Ishibashi et al., J. Dent. Res., 85(12), 1101-1105 (2006).

 

in vitro

 

【难转染细胞——U937细胞RNAi】

 

  总所周知,用脂质体和电转的方法将siRNA转到U937人单核细胞白血病细胞中非常困难,但我们通过实验证明,siRNA与GenomONE-Neo结合后转染该细胞,其knock-down效率可达85%以上。

 

♦ U937细胞经siRNA转染72小时后收集,用RT-PCR和WB分别检测mRNA和蛋白量的变化情况。

Real-time PCR                         Western blotting

GenomONE™ Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-wako富士胶片和光      GenomONE™ Neo E仙台病毒包膜转染试剂转染试剂-wako富士胶片和光

 

 

  左图:转染Cathepsin G的特异性siRNA后,其对应的mRNA减少到14%

  右图:转染Cathepsin G的特异性siRNA后,其蛋白水平减少到15%

 

 【相关文献】 
  Y. Tsuchiya et al, Free Radical Biology & Medicine, 43, 1604-1615 (2007).

 

试剂盒组成

 

产品编号

冻干

HVJ-E

(灭活HVJ)
 0.26 mL/vial
  (重组时)

试剂A

(增强融合)
 0.5 mL/vial

试剂B

(融合试剂)
 0.3 mL/vial

试剂C

(增强导入)
 1.0 mL/vial

缓冲液

(用于悬浮和稀释​)
 6.5 mL/vial

385-18731

1 vial

1 vial

1 vial

1 vial

1 vial

381-18733

4 vials

1 vial

1  vial

1  vial

1 vial

385-18736

40 vials

10 vials

10 vials

10 vials

10 vials

 

 

◆产品列表

 

产品编号 产品名称 规格
385-18731

GenomONE® Neo EX(FD)转染试剂套装

1 set
381-18733 4 sets
389-18734 16 sets
385-18736 40 sets