葡聚糖凝胶G-150
货号:BS208-100g
规格:100g
品牌:Jinpan
产品简介:
葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶
胀。亲水基质使其非特异性吸附最小化,并在生物分子分离期间得到较高的回收率。G 型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程,可在较低的压力下获得较高的流速。另外,粗级也可用于批量工艺。
凝胶类型:凝胶过滤填料,亲水型凝胶
结构成分:交联右旋糖酐
粒径:40-120µm
工作 PH 值:2-10
操作温度:4-40℃
球蛋白分离范围:5000-300000
储存条件:RT
外观:白色粉末
单位:瓶
有效期:2 年
应用:
利用分子筛作用,进行蛋白分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定、平衡常数测
定等。
使用方法:(根据实际需要参阅相关文献配制和使用)
葡聚糖凝胶 G 系列产品以干粉形式存在,使用前必须溶胀,在膨胀期间应避免过度搅
拌,因为它可能破坏填料,不要使用磁力搅拌器。
3.1 填料的准备(1)将填料在过量去离子水或缓冲液中,室温条件下膨胀 3-5 小时或过夜,或用沸水浴膨胀 1-5 小时。洗脱缓冲液不应含有高粘度的试剂。溶胀过程中,如果上层有碎胶,请去除。
(2)将溶胀好的填料,所有的缓冲液等材料平衡至实验操作温度。
3.2 装柱
(1)检查层析柱所有部件,特别是过滤网,密封圈,螺旋塞是否紧密,玻璃管是否干净和完整。
(2)将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。
(3)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液
口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
(4)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过,使柱床稳定(注意压力不要超过填料最大耐压)。
3.3 平衡
上样前平衡层析柱至少 5-10 个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的 PH 值和
等电点等于上柱的 Buffer 的 PH 值和等电点)。
3.4 上样
样品一定要离心或过滤后(0.45um)上样。
凝胶过滤的上样量一般为不大于 5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在 1-2%的柱
床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到 20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高过高的凝胶层会引起较大的反压,应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制,脱盐时高径比为 5:1 即可。
3.5 洗脱方法
可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱 Buffer 中加入 NaCl 等梯度
洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化。
3.6 在位清洗(CIP)
凝胶使用十次后作一次 CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以
40cm/h 用 0.1 M 氢氧化钠洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。3.7 保存凝胶柱暂时不用,可将其回收,一般方法是将凝胶用水冲洗干净滤干,可加入 0.02%
叠氮化钠防腐或用 20%乙醇浸泡,以控制微生物生长。
注意事项:
1.上样之前,样品必须经过膜过滤及去除色素,否则杂质及色素会被吸附到填料上,影
响填料的正常使用。
2.在使用过程中,避免使用高浓度的强酸强碱,酸和碱的浓度应低于 0.15 摩尔。碱会使
流速变慢。
3.不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。
4.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
货号 | BS208-100g |
规格 | 100g |
品牌 | Jinpan |
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