一步法RT-PCR检测试剂盒
货号:BL640B
规格:200T
品牌:biosharp
商品详情:
One-Step RT-PCR Kit
一步法RT-PCR检测试剂盒
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
BL640A |
一步法RT-PCR检测试剂盒 |
50T |
BL640B |
一步法RT-PCR检测试剂盒 |
200T |
产品简介:
本试剂盒采用一步法高效地将RNA反转录成第一链cDNA,并进行PCR扩增。通过PCR技术,以RNA为模板,利用基因特异性引物、One-step RT-PCR Mix和Reaction Buffer合成第一链cDNA后,在热启动DNA聚合酶的作用下检测目的基因的含量。本试剂盒为反转录和PCR反应均在同一管内完成,无需额外开管和移液操作,操作简便快速,最大限度地减少人为误差和人工操作时间,并减少污染风险,提高检测通量。用户只需自备引物和RNA样品即可。反应产物加入loading buffer后可直接电泳检测。本试剂盒中的5×Reaction Buffer包含必要的离子组分、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂,One Step RT-PCR Enzyme Mix包含比例优化的逆转录酶、RNA酶抑制剂以及DNA聚合酶。
产品组分
组分 |
BL640A(50T) |
BL640B(200T) |
One–step RT-PCR Enzyme Mix |
75μl |
300 μl |
5 × Reaction Buffer |
200 μl |
800 μl |
RNase-free ddH2O |
1 ml |
4×1 ml |
使用方法:
1. 按照下表配制反应体系
组分 |
体积 |
RNA 模板 |
1-2 μl(1-2ug) |
上游引物(10 μM) |
0.5 μl–1μl |
下游引物(10 μM) |
0.5 μl–1μl |
5 × Reaction Buffer |
4 μl |
One-step RT-PCR Mix |
1.5 μl |
RNase-free ddH2O |
补至 20 μl |
2. 反应设置
流程 |
温度 |
时间 |
循环数 |
反转录 |
50℃ |
30 min |
1 |
预变性 |
94℃ |
2 min |
1 |
变性 |
94℃ |
30 sec |
40 |
退火 |
50-60℃ |
30 sec |
|
延伸 |
72℃ |
1 kb/min |
|
终延伸 |
72℃ |
5-10 min |
1 |
3. PCR程序结束后,在PCR产物中添加loading buffer后进行琼脂糖电泳检测。
保存条件
-20℃保存,保质期 2 年。
货号 | BL640B |
规格 | 200T |
品牌 | biosharp |
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