Trizol Invitrogen原装 100ml
英文名称 | Trizol |
储存条件 | 2-8℃ |
外观(性状) | 液体 |
单位 | 瓶 |
规格 | 100ml |
The TRIzol® Max™ Bacterial RNA Isolation Kit contains TRIzol® Reagent and Max Bacterial Enhancement Reagent. Store at 2°C to 8°C.
TRIzol® 试剂是一种完全的即用型试剂,可用于提取高质量的总RNA或者从各种生物样本中同时提取RNA、DNA和蛋白质。这种酚和异硫氰酸胍单相溶液,可用于提取人、动物、植物、酵母或细菌来源的细胞和组织样本中的纯RNA、DNA和蛋白质,只需一个小时即可完成。
• 从一份样品同时提取RNA、DNA和蛋白质
• 即便是难以处理的样本类型,亦具有出色的裂解能力
• 优化的配方和实验方案,适用于组织、细胞、血清、病毒和细菌等多种样品类型
从多种样本体积和来源获得可靠的纯化RNA
TRIzol® 试剂用于处理人、动物、植物或细菌来源的少量组织 (50-100 mg) 和细胞 (5 × 106),以及大量组织 (≥1 g) 和细胞 (>107),均可获得极佳的性能,且附带样本纯化实验方案。在TRIzol® 试剂进行样本匀浆化的过程中,它可以破坏细胞,溶解细胞组分,同时高效的抑制RNA酶的活性,从而维持RNA的完整性。TRIzol® 试剂方法十分简单,可同时处理大量样本。整个过程可在一小时内完成。采用TRIzol® 试剂提取的总RNA不会被蛋白质和DNA污染。
适用于多个分子靶点的提取
TRIzol® 试剂使您可以顺序沉淀单一样本中的RNA、DNA和蛋白质。采用TRIzol® 试剂进行样本匀浆化后,加入氯仿,匀浆物可分成透明的上层水相层 (含有RNA)、相界面和红色的下层有机层 (含有DNA 和蛋白质)。然后用异丙醇从水相层中沉淀出RNA。用乙醇从相界面/有机层中沉淀出DNA。利用异丙醇沉淀从酚-乙醇上清液中沉淀出蛋白质。洗涤沉淀的RNA、DNA或蛋白质,去除杂质,重悬浮后供下游应用。
仅供研究使用。不得用于动物或人类的诊断或治疗。
性能描述:
TRIzol试剂(美国专利号,5346994)是即用型细胞或组织总RNA提取试剂。该试剂是利用苯酚和异硫氰酸胍一步完成提取RNA的方法,是对Chomczynski和Sacchi开发的单步RNA提取法的改善。在匀质化或裂解样品中,TRIzol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞并溶解细胞成分。加入氯仿离心后,溶液分离成水相和有机相。 仅RNA存在于水相中。将水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,样品中DNA和蛋白质可通过相继沉淀回收。用乙醇沉淀可从中间相得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。
此技术既可良好的应用于少量组织(50-100mg)和细胞(5×106),也可用于大量的组织(≥1 g)和细胞(>107)的处理,组织和细胞不限于人、动物、植物或细菌。TRIzol试剂使用简单方便,可同时处理大量样本。整个过程可在一小时内完成。用TRIZOL提取总RNA可避免蛋白质和DNA污染。提取的RNA可用于Northern blot分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。
TRIzol试剂方便提取不同种类、不同分子大小的RNA。例如,从大鼠肝中提取RNA,经琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色,高分子量RNA离散带长度可高达7 kb和15 kb,(组成mRNA’s和hnRNA’s),两个主要的核糖体RNA带在~5 kB(28 S)和~2 Kb(18 S)。低分子量RNA介于0.1和0.3 kB之间(tRNA,5S)。分离出的RNA用TE稀释,其A260/A280比值≥1.8。
防止RNA酶污染的注意事项
在不当的技术操作过程中,RNA酶可在任何提取程序中意外引入RNA的制备中。由于酶的活性难以抑制,所以必须防止其引入。进行RNA工作时,下列准则应予以遵守。
①一直戴着手套。皮肤上通常包含的细菌和霉菌,可污染RNA的制备,同时也是RNA酶的一个来源。良好的微生物操作技术可防止微生物污染。
②使用无菌制品,专为RNA工作准备的一次性塑料器皿和自动吸管避免与共用设备的RNA酶交叉污染。例如,一个实验室正在使用的RNA探针可能用得上RNA酶A或RNA酶T1以减少过滤背景,其中任何非一次性物品(如自动吸管)可能是大量RNA酶的来源。
③TRIzol试剂可保护RNA酶对RNA的污染。下游样品处理要求非一次性的玻璃器皿或塑料器皿无RNA酶。玻璃物品可以在150 ℃烘烤4小时,塑料制品,可浸泡10分钟的0.5 M NaOH溶液,然后用清水彻底冲洗,并高压蒸汽灭菌。
其他需要注意的事项:
①用小于2毫升体积的TRIZOL试剂工作时,建议使用一次性透明聚丙烯管。
②对于较大的体积,用玻璃(Corex)或聚丙烯管,并测试以确保该管装满TRIzol试剂和氯仿时可承受12,000×g的离心力,不要使用泄漏或有裂纹的管子。
③离心前平衡管子的重量
④ 玻璃管必须用封口膜密封,密封时封口膜要覆盖有螺丝处,聚丙烯管离心前必须盖好。
警告:本品与皮肤接触及吞咽有毒。可导致烧伤。与皮肤接触后,应立即用洗涤剂和大量清水冲洗。如感到身体不适,应就医(如需要,请出示本产品标签)。本产品含有苯酚和其他成分。已经证明TRIzol 在室温下可稳定保存12个月。但我们建议在储存于2-8°C,以保证最佳性能。