91154Irvine化学成分限定的T细胞培养基现货是一种即用型化学成分，无动物成分的培养基。 它被优化和设计用于人源T细胞的培养，并推荐用于人T淋巴细胞的培养和扩增。 在源自人外周血单核细胞的CD3+T淋巴细胞上评估该培养基的性能。PRIME-XV T细胞CDM旨在与细胞因子补充剂一起用于T淋巴细胞的离体培养。 使用的细胞因子混合物取决于每个使用者的实验要求。

91154Irvine化学成分限定的T细胞培养基现货

订购信息

产品	货号	规格	储存
PRIME-XV®T cell CDM 化学成分限定的T细胞培养基	91154	1L/瓶	2～8℃

 

产品特点

1. 无血清成分

2. 无异种蛋白

3. 化学成分明确

4. 不需要额外添加血清或者白蛋白，支持T细胞体外活化及扩增培养；

5. T细胞（CAR-T）培养性能明显优于市面上的无血清培养基；

6. GMP条件下生产以及DMF备案

 

 

91154Irvine化学成分限定的T细胞培养基现货提供zui佳性能

1. 在平板、细胞培养袋和G-Rex中支持活跃的T细胞生长，同时维护其功能

2. 提供批量到批次的一致性。

3. 消除未定义成分对T细胞表型的影响

4. 支持目标T细胞类型(如Th)的极化1T调节细胞

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存储说明和稳定性

使用无菌技术处理以避免污染。 储存在2-8oC，避光，直到准备使用。 该产品在原始包装下在2-8oC下稳定，从1L PET瓶制造之日起14个月。 打开后，产品应在2-8oC的黑暗中储存，并在4周内使用。 请勿在指定的到期日后使用。 未经验证可在超过未开封的保质期内使用。

 

使用说明

制备用于T细胞活化的平板

1. 用浓度为1μg/ mL的抗人CD3（克隆UCHT1）和抗人CD28（克隆CD28.2）抗体在37℃oC下涂覆2小时或在2-8℃下过夜oC用Parafilm®来防止蒸发。

2. 吸出涂层溶液。

3. 在加入细胞之前用PBS洗涤两次。

 

制备T细胞

1. 在使用前，在37oC下平衡足够量的PRIME-XV T细胞CDM至少15分钟。

2. 通过在37oC水浴中温和搅拌小瓶1分钟，解冻新鲜的冷冻保存的PBMC小瓶。

3. 小心地将小瓶的全部内容物转移到含有预热的10mL PRIME-XV T Cell CDM的15mL锥形管中。

4. 将细胞以200g旋转10分钟。

5. 小心吸出上清液，留下覆盖细胞沉淀的最小体积的培养基。

6. 补充PRIME-XV T细胞CDM，相当于200 U / mL（11,000 IU / mL）的IL-2。

7. 用补充的PRIME-XV T细胞CDM重悬细胞沉淀，并将细胞以100,000细胞/ mL的密度转移到包被的平板上。

8. 将细胞在37℃oC和5％CO 孵育。

9. 每2至3天培养，用含有相当于200U / mL（11,000IU / mL）IL-2的PRIME-XV T细胞CDM进食。 饲料量应至少为原始培养体积的70％。

注意：应根据细胞密度和生长情况调整摄食事件和体积的频率，以避免过度融合。

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收获T细胞

1. 使用细胞刮刀轻轻地从培养皿中取出T细胞。

2. 用温度平衡的PRIME-XV T Cell CDM洗涤。

3. 细胞准备好进行分析，存储或重新种植。

 

G-Rex 6孔培养板中T细胞扩增的方案

第0天：T细胞的电镀和活化

1. 在使用前，在37℃下平衡足够量的PRIME-XV T Cell CDM至少15分钟。注意：为避免温度循环，请确定平衡前所需的总体积。

2. 将小瓶在37°C水浴中轻轻搅拌1分钟，解冻一小瓶冷冻细胞。 或者，使用新鲜分离或收获的细胞。

3. 小心地将小瓶的全部内容物转移到含有10mL PRIME-XV T Cell CDM的15mL锥形管中。

4. 将细胞以200g旋转10分钟。

5. 小心吸出上清液，留下覆盖细胞沉淀的最小体积的培养基。

6. 补充适当体积的PRIME-XV T细胞CDM，相当于200 U / mL（11,000 IU / mL）的IL-2。

7. 将5×106PBMCs /孔置于35mL完全培养基中。

8. 添加以下可溶性激活抗体：

LEAF纯化的抗人CD3浓度为10μg/ mL（克隆UCHT1）LEAF纯化的抗人CD28浓度为5μg/ mL（克隆CD28.2）

9. 将细胞在37℃和5％CO2的培养箱中孵育。

第3天：继续刺激

10. 以200 U / mL（11,000 IU / mL）添加额外的IL-2。

第7天：媒体交流

11. 通过从井的顶部边缘缓慢移液，移除25mL废介质，小心避免意外吸入细胞。

12. 轻轻旋转或重新悬浮剩余的液体，使细胞均匀分散细胞计数。

13. 加入30 mL新鲜培养基补充剂，IL-2，200 U / mL（11,000 IU / mL）。

第10天：继续刺激

14. 以200 U / mL（11,000 IU / mL）添加额外的IL-2。第14天：收获细胞

15. 通过从井的顶部边缘缓慢移液，移除25mL废介质，小心避免意外吸入细胞。

16. 轻轻旋转或重新悬浮剩余的液体，使细胞均匀分散细胞计数。

17. 以剩余体积收获细胞。

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