上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
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■ 制品内容 (Code No.: R022A : 50 次量*1) |
PrimeScript RTase (for 2 step) |
25 μl |
5×PrimeScript Buffer |
200 μl |
RNase Inhibitor (40 U/μl) |
25 μl |
dNTP Mixture (10 mM each) |
50 μl |
Oligo dT Primer (2.5 μM) |
50 μl |
Random 6 mers (20 μM) |
50 μl |
PrimeSTAR Max Premix (2×) |
625 μl × 2 |
Control F-1 Primer*2 (20 μM) |
10 μl |
Control R-1 Primer*3 (20 μM) |
10 μl |
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) |
20 μl |
RNase Free dH2O |
1 ml |
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*1 反转录反应20 μl、PCR反应50 μl,2 Step RT-PCR时可使用50次。 *2 Positive Control RNA用上游引物。 *3 Positive Control RNA用下游引物。 |
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Limited Use Label License: [M54] |
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■ 制品说明 |
PCR (Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应) 是一种体外扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后进行扩增 (RT-PCR),PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。 PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit是一种对Total RNA及mRNA合成cDNA时具有高保真性的RT-PCR用试剂盒。 本试剂盒中使用的反转录酶是Takara改良的M-MLV新型反转录酶PrimeScript RTase,PCR时使用了对cDNA扩增时具有很高保真性的DNA聚合酶PrimeSTAR MAX DNA Polymerase。因PrimeSTAR MAX是兼具高保真性与高扩增效率的预混型酶,模板浓度适用范围广,可用于高保真性的cDNA克隆等重要反应中。 2 Step RT-PCR作为本试剂盒的标准操作流程,2 Step RT-PCR操作流程具有以下优点: 1. 能够高效率地获得高保真性的RT-PCR扩增产物。 2. 在42℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸。 3. 反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广,便于使用。 本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需要的全部试剂。并且,也可以进行1 Step RT-PCR反应。 |
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■ 保存 |
-20℃。 注意:PrimeSTAR MAX Premix (2×) 反复冻融25次后,已确认其活性没有发生改变,但要注意尽量避免冻融次数过多。 |
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■ 试剂盒特点 |
使用2 Step RT-PCR标准操作流程时 |
RNA模板 |
适用于所有RNA |
扩增片段大小 |
6 kb产物 |
反转录酶 |
PrimeScript RTase (反应温度在42℃) |
DNA Polymerase |
PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix) |
RNase Inhibitor |
必须使用 (Kit中含有) |
1st strand cDNA合成用引物 |
Random 6 mers、Oligo dT Primer、特异性下游引物可供选择 |
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使用1 Step RT-PCR操作流程时 |
RNA模板 |
适用于所有RNA |
扩增片段大小 |
6 kb产物 |
反转录酶 |
PrimeScript RTase (反应温度50℃) |
DNA Polymerase |
PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix) |
RNase Inhibitor |
必须使用 (Kit中含有) |
1st strand cDNA合成用引物 |
使用特异性下游引物 (PCR扩增反应用反义链引物) (不可使用Random 6 mers及Oligo dT Primer) |
操 作 |
在同一个反应管中可连续进行RT-PCR反应 |
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页面更新:2023-11-01 16:22:53