检测原理：

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人IL-8抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的IL-8与固相抗体和检测抗体结合，形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物，避光显色。加入终止液终止反应，在450 nm波长(参考校正波长540nm或570nm)测定吸光度值。

检测类型：双抗夹心法

形式：预包被96孔板

检测样本类型：细胞上清液，血清，血浆

上样量：100ul

试剂盒组分：

预包被96孔板、标准品、IL-8检测抗体、稀释用缓冲液、显色液（A、B）、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。

灵敏度：7.8pg/mL

检测范围：31.2 – 2,000 pg/mL

回收率范围：96-118%

保存方法：2-8℃

标准曲线图

背景：

白细胞介素-8（IL-8，也称GCP-1、NAP-1和CXCL8）是属于α型或CXC家族的8-9kDa的趋化因子，可与肝素结合。目前为止，共发现了15种人的CXC家族蛋白，大小在8-12kDa之间。绝大多数位于人类4号染色体，都具有典型的三β折叠层/一个α螺旋结构，多数在N端显示Glu-Leu-Arg三肽基序。人IL-8先合成为一个99氨基酸前体，其中包含一个20氨基酸的信号序列，和一个79个氨基酸的成熟区域。它可作为单体、同源二聚体、及与CXCL4/PF4形成的异源二聚体在体内循环。IL-8单体被认为是最具有生物活性的，而异源二聚体可能会增强PF4的活性。在氨基酸水平，成熟的人IL-8与猪和犬分别有65%和70%的同源性。在啮齿动物中，IL-8的相应基因尚未发现。通过选择性剪接和差别蛋白水解产生了多种IL-8亚型。选择性剪接发生在C-端，那里有一个11个氨基酸替代（位置在aa#92-99）。蛋白酶水解作用可能是一个细胞的特定事件，它在IL-8的N-端产生截断。例如，成纤维细胞和血管内皮细胞将第21和第22氨基酸切断，形成IL-8，而单体细胞和淋巴细胞在第21-25氨基酸切割，产生IL-8。这些短式IL-8一般来说具有更高的生物活性，尤其是针对CXCR 1IL-8受体的活性增高。大约15%的IL-8在前体Arg27位发生了瓜氨酸化，这可提高IL-8的半衰期和促使白血球增多。很多类型的细胞都分泌IL-8，其中包括单核细胞和中性粒细胞、成纤维细胞和角质形成细胞、肥大细胞、内脏平滑肌细胞、树突状细胞、II型大肺泡细胞和内皮细胞。

IL-8受体有两个，都属于G蛋白耦联受体蛋白：CXCR1/IL-8RA和CXCR2/IL-8RB，二者之间的氨基酸序列享有77%同源性。CXCR1分子量为45-50kDa，几乎完全由IL-8独享；CXCR2分子量为35-40kDa，由所有的CXC趋化因子所共有。CXCR1和CXCR2分别形成组成型同源二聚体，这似乎是它们的功能性构型。当同一个细胞表达时，异源二聚体也会形成；但当它与IL-8结合后便会被解体。CXCR2对低浓度IL-8有响应，且主要与趋化和MMP-9释放有关。与此相反，CXCR1对高浓度IL-8有响应，并与呼吸爆发及磷脂酶D2的激活有关。因此，在中性粒细胞CXCR2被认为可引导中性粒细胞迁移到炎症部位，然后引发CXCR1介导的抗菌活性。

IL-8最著名的功能是它在免疫细胞中的促炎作用。从本质上讲，IL-8是由暴露于炎性刺激因子的多种细胞类型分泌。对于单核细胞/巨噬细胞来说，微生物的暴露引起IL-8的释放；随后，CXCR2介导的趋化作用将中性粒细胞迁移到抗原攻击的部位，并伴随下一步抗菌活性的激活及启动。IL-8可增强骨髓M-CSF的作用，从而引起粒细胞的成熟和释放。IL-8的这两个功能相辅相成。有报道说，IL-8对肿瘤相关的内皮细胞具有血管生成功能。此时，肿瘤源性的IL-8可以采取一种旁分泌方式激活血管内皮细胞的CXCR1和CXCR2。CXCR1和CXCR2都与PI3-K/Akt和RasGTP信号通路相关，参与细胞的存活和增殖。此外，IL-8正调节VEGFR2和EGFR属于介导细胞生长和迁移的受体络氨酸激酶。