反转录试剂盒（含热敏双链DNA酶）
货号：BL696A
规格： 100T
品牌：biosharp
Reverse Transcription Kit (with dsDNase)
反转录试剂盒（含热敏双链DNA酶）
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产品名称 |
规格 |
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BL696A |
反转录试剂盒（含热敏双链DNA酶） |
100T |
产品简介：
本产品是一种高效、稳定、快速并可以去除基因组 DNA 污染的反转录系统，只需加入模板 RNA 和水即可进行反应，合成的第一链cDNA可广泛用于文库构建、第二链合成、杂交、PCR扩增、RT-qPCR检测等。5×Reaction Mix包含反转录反应所需的缓冲液，dNTPs及优化的反转录引物，Enzyme Mix包含Reverse Transcriptase, Ribonuclease Inhibitor和dsDNase，简化了加样步骤。试剂盒采用的反转录酶去除了RNase H活性，且热稳定性更强，可耐受55℃反应，提高复杂RNA模板的反转录效率。该反转录酶产物得率更高，获得的cDNA片段更长，模板使用范围更广。
dsDNase为新型热敏双链特异性核酸酶，可在反转录过程中直接降解去除RNA样品中残留的基因组DNA（gDNA）污染，而不消化RNA样品、反转录引物及合成的cDNA。并且该酶具有热敏感性，可在55℃快速不可逆失活，实现去除基因组污染与反转录反应的同步进行。
产品组成：
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组分 |
100T |
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5× Reaction Mix |
400 μl |
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Enzyme Mix |
300 μl |
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DEPC-treated Water |
2×1 ml |
使用方法：
1、将模板RNA和试剂在冰上解冻，使用前将每种溶液轻弹或者轻微涡旋振荡混匀，简短离心以收集残留在管壁的液体到管底。
2、在RNase free管中冰上配制以下反应体系：
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组分 |
体积 |
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Total RNA/mRNA |
As Required* |
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DEPC-treated Water |
Up to 13 μl |
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5× Reaction Mix |
4 μl |
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Enzyme Mix |
3 μl |
*:Total RNA建议用量为10 pg-5 μg，mRNA建议用量为10 pg-500 ng，为保证反转录成功，请使用高质量RNA模板。
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温度 |
时间 |
说明 |
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25℃ |
10min |
随机引物与RNA模板配对，去除基因组DNA |
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55℃ |
15min |
反转录反应及dsDNase快速灭活 |
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85℃ |
5min |
反转录酶灭活 |
3、移液器轻轻吹打混匀，运行如下程序
4、得到的cDNA产物可立即用于PCR或qPCR反应，或在-20℃保存，并在半年内使用；长期存放建议分装后在-80℃保存。cDNA应避免反复冻融。
注意事项：
1、避免RNase污染。
2、为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3、5× Reaction Mix及Enzyme Mix易吸附在管壁和吸头外导致损失，用前请瞬时离心，并避免吸头外壁沾附损失。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存方法：
避免反复冻融，-20 ℃保存2年。
| 货号 | BL696A |
| 规格 | 100T |
| 品牌 | biosharp |